生物細(xì)胞論文
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生物細(xì)胞論文【1】
醫(yī)學(xué)院校遺傳與細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)存在的問(wèn)題及解決辦法
論文題目：醫(yī)學(xué)院校遺傳與細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)存在的問(wèn)題及解決辦法
論文語(yǔ)種：中文
您的研究方向：遺傳與細(xì)胞生物學(xué)
是否有數(shù)據(jù)處理要求：否
您的國(guó)家：中國(guó)
您的學(xué)校背景：一般重點(diǎn)
要求字?jǐn)?shù)：3000字左右
論文用途：發(fā)表論文-國(guó)家
補(bǔ)充要求和說(shuō)明
醫(yī)學(xué)院校遺傳與細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)存在的問(wèn)題及解決辦法
摘要：本文以遺傳與細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題作為主要研究對(duì)象，重點(diǎn)分析了目前此門課程教學(xué)過(guò)程中遇到的問(wèn)題，并提出了相應(yīng)的解決方案，以提高教學(xué)質(zhì)量。
結(jié)果表明：傳統(tǒng)的教學(xué)方式與方法不利于此門課的教授，只有運(yùn)用多種教學(xué)手段，積極改變學(xué)生提出的意見(jiàn)，才能在此門課的教學(xué)過(guò)程中，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，提高教學(xué)的質(zhì)量。
關(guān)鍵詞：遺傳與細(xì)胞生物學(xué) 問(wèn)題 教學(xué)改革 多媒體 PBL
遺傳與細(xì)胞生物學(xué)是生命科學(xué)中前沿性學(xué)科之一，是支撐其他醫(yī)學(xué)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)學(xué)科。
此學(xué)科是位于微觀的分子生物學(xué)和宏觀的個(gè)體生物學(xué)之間,同時(shí)也是一門承上啟下的學(xué)科,遺傳與醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)既是醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科，
又是醫(yī)學(xué)的前沿學(xué)科，許多醫(yī)學(xué)疑難問(wèn)題的解答和最終解決都有賴于遺傳與細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展，因此它是每一個(gè)醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)生必須掌握的一門學(xué)科。
一、存在的問(wèn)題
二、解決方法
總之，遺傳與細(xì)胞生物學(xué)是一門發(fā)展迅速的前沿學(xué)科，傳統(tǒng)的教學(xué)方式與方法已經(jīng)不適合當(dāng)今遺傳與細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展速度。
只有不斷豐富教學(xué)資源，改變教學(xué)方法，增加教學(xué)手段，才能激發(fā)學(xué)生的積極性，提高學(xué)生的知識(shí)面，從而提升教學(xué)質(zhì)量和教學(xué)效果。
參考文獻(xiàn)：
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[3] 劉云，陳保鋒，申躍武，等. 醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)方法的探索[J]. 川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，25( 4) : 393-395
生物細(xì)胞論文【2】
產(chǎn)生物胺酒酒球菌及葡萄酒之生物胺檢測(cè)
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 生物胺
生物胺存在于多種食品中，是由微生物對(duì)氨基酸的脫羧反應(yīng)產(chǎn)生的含氮化合物。
多數(shù)生物胺在人體內(nèi)有藥理性活性(Silla 1996; Ten Brink 1990)。
通常攝入生物胺不會(huì)引起不良反應(yīng)，因?yàn)槟c內(nèi)的胺氧化酶可以迅速代謝這些化合物，使它們失去毒性(Askar andTreptow 1986)。
如果新陳代謝胺的能力達(dá)到過(guò)飽和狀態(tài)或者酶的代謝活性被抑制因子抑制，則會(huì)引發(fā)食品中毒現(xiàn)象(Joosten and Nu ez 1996)。
脫羧反應(yīng)可以通過(guò)兩條生物化學(xué)途徑引發(fā)，食物內(nèi)的脫羧酶自發(fā)反應(yīng)或者來(lái)自微生物釋放的外在脫羧酶介導(dǎo)。
在包含蛋白質(zhì)和氨基酸或者處在利于微生物形成生物胺條件下的食物中，都有可能存在生物胺。
部分常見(jiàn)生物胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖 1-1：
1.2 生物胺的生理功能
一些生物胺對(duì)人和動(dòng)物的一些生理學(xué)功能起著重要的作用，例如調(diào)節(jié)體溫、調(diào)節(jié)胃的蠕動(dòng)、控制大腦活動(dòng)等(Ten Brink 1990)。
形成生物胺的生理學(xué)作用往往是微生物抵抗酸性環(huán)境的應(yīng)激機(jī)制，生物胺的產(chǎn)生可以使環(huán)境 pH 升高，緩解酸性壓力，已經(jīng)在產(chǎn)尸胺細(xì)菌中得到廣泛的研究(Lee et al. 2007)。
生物胺的產(chǎn)生提供一種獲得能量的方式，導(dǎo)致普遍的質(zhì)子動(dòng)力(Molenaar et al. 1993)。
多胺廣泛的存在于所有的生物體內(nèi)，在細(xì)胞生長(zhǎng)和分化方面起著重要的作用(Tabor1984)。
最佳生理學(xué)濃度的多胺控制多種細(xì)胞活動(dòng)，包括 DNA 復(fù)制，基因表達(dá)，蛋白質(zhì)合成和充當(dāng)細(xì)胞表面受體功能(Pegg 1988)。
但是在很多病理學(xué)條件下，通過(guò)不同的代謝機(jī)制例如生物合成途徑的激活，胞內(nèi)釋放的減少，從胞外環(huán)境攝取的增加等途徑，多胺濃度會(huì)大幅度增加。
高含量的多胺主要通過(guò)氧化機(jī)制對(duì)細(xì)胞造成毒性，促進(jìn)細(xì)胞死亡(Morgan 1990)。
Russell(1971)首次提出癌癥病人尿中的多胺含量增加，使多胺可以作為惡性腫瘤的臨床生化標(biāo)記。
多胺對(duì)細(xì)胞分化增殖的作用主要通過(guò)多胺合成抑制子來(lái)實(shí)現(xiàn)。
多胺對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增值的作用已經(jīng)得到良好的評(píng)估和確定，普遍存在于所有類型的細(xì)胞中，并且是相似的。
在缺乏多胺的細(xì)胞里，總糖基化能力沒(méi)有受到影響，但是高分子量蛋白聚糖的合成被完全抑制(Parkkinen, et al 1997)。
腐朽食品或者在不衛(wèi)生條件下獲得的產(chǎn)品，通常含有高含量的生物胺，例如組胺、酪胺、尸胺和腐胺等，因此生物胺可以作為食品腐朽的指示器。
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)菌種及酒樣
根據(jù)趙艷卓等(2011)選擇基因組中具有組氨酸脫羧酶基因和鳥氨酸脫羧酶基因的短乳桿菌 ATCC33222 (Lactobacillus sp.)
以及基因組中具有酪氨酸脫羧酶基因的短乳桿菌 ATCC367(Lactobacillus brevis)分別作為組胺、腐胺以及酪胺的陽(yáng)性對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)菌株。
供試菌株：40 株酒酒球菌(Oenococcus oeni)均為西北農(nóng)林科技大學(xué)葡萄酒學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室保存。
供試酒樣：供研究的 8 個(gè)葡萄酒樣品由新疆產(chǎn)區(qū)某酒廠提供。
在葡萄酒中的一些氨基酸可以發(fā)生脫羧反應(yīng)，生成生物胺，通常是是組胺、酪胺、腐胺。
葡萄酒中生物胺的形成被認(rèn)為主要是因?yàn)榘l(fā)酵過(guò)程中衛(wèi)生條件較差并且認(rèn)為葡萄酒中組胺的生成是腐朽菌(主要是片球菌而不是酒酒球菌)的作用。
在生物胺中，組胺的生理毒性最強(qiáng)。
許多國(guó)家已經(jīng)作出了葡萄酒中組胺的限量范圍。
蘋果酸乳酸發(fā)酵是酒釀造過(guò)程中重要的生物過(guò)程，因?yàn)樗鼫p少了酒中的酸度，如果由合適的乳酸菌來(lái)進(jìn)行，還可以提高酒的香氣和成熟過(guò)程中的微生物穩(wěn)定性(Henick-Kling, 1993)。
MLF被認(rèn)為對(duì)所有的紅葡萄酒和一些白葡萄酒是必要的。
酒酒球菌由于它對(duì)酸的抗性，是用來(lái)進(jìn)行MLF自然發(fā)酵使用最頻繁的細(xì)菌。
因此，酒酒球菌被用作誘導(dǎo)MLF種子培養(yǎng)的優(yōu)先菌種。
然而，酒酒球菌被發(fā)現(xiàn)有產(chǎn)生高含量生物胺的能力。
生物胺可以對(duì)人產(chǎn)生毒性，與生物胺的濃度和個(gè)體的敏感性有關(guān)。
近年來(lái)頻繁爆發(fā)的食品安全問(wèn)題，使人們對(duì)于食品安全越來(lái)越關(guān)心和關(guān)注。
在葡萄酒釀造過(guò)程中，選擇不具有氨基酸脫羧酶基因，不產(chǎn)生生物胺的乳酸菌進(jìn)行蘋果酸乳酸菌發(fā)酵，對(duì)葡萄酒的安全性是有重要意義的。
乳酸菌產(chǎn)生的生物胺給發(fā)酵食品帶來(lái)一定的安全隱患。
目前，世界上有很多人每天都在飲用葡萄酒。
葡萄酒也漸漸被中國(guó)人接納，喝葡萄酒的人數(shù)與日俱增。
保證葡萄酒食品安全，采用不含氨基酸脫羧酶基因的乳酸菌發(fā)酵葡萄酒，降低葡萄酒中生物胺的含量是很有意義的。
2.2 培養(yǎng)基
試驗(yàn)使用的主要培養(yǎng)基有 11111 培養(yǎng)基、ATB 培養(yǎng)基、改良 MRS 培養(yǎng)基(趙艷卓等 2011)。
含氨基酸 ATB 培養(yǎng)基：在體積為 1L 的 ATB 培養(yǎng)基中，加入組氨酸、酪氨酸和鳥氨酸各 1g，其余條件與 ATB 培養(yǎng)基配制相同。
文獻(xiàn)利用引物對(duì) JV16HC/JV17HC、TD2/TD5、AODC1/16 分別作為檢測(cè)組胺、酪胺和腐胺產(chǎn)生菌的特異引物(Ruiz 2010; Izquierdo-Ca as 2009; Coton 2004; Takahashi2003; Costantini 2009)，均能擴(kuò)增出特異性的條帶，且擴(kuò)增效率都較高。
因此，本研究根據(jù)文獻(xiàn)描述，委托上海生工合成 JV16HC/JV17HC、TD2/TD5、AODC1/16，作為檢測(cè)生物胺產(chǎn)生菌的特異引物。
第三章 結(jié)果與分析....18
3.1 基因組 DNA 的檢測(cè)..... 18
3.2 退火溫度對(duì) PCR 擴(kuò)增結(jié)果的影響...... 18
3.3 酒酒球菌氨基酸脫羧酶基因檢測(cè) ....... 22
3.3.1 酒酒球菌組氨酸脫羧酶基因的檢測(cè) ........ 22
3.3.2 酒酒球菌酪氨酸脫羧酶基因的檢測(cè) ........ 23
3.3.3 酒酒球菌中鳥氨酸脫羧酶基因的檢測(cè) .... 23
3.4 酒酒球菌氨基酸脫羧酶基因 PCR 擴(kuò)增.... 24
3.5 高效液相色譜方法的建立 ....... 24
3.5.1 衍生試劑的選擇 .... 24
3.5.2 檢測(cè)器的選擇 ........ 25
3.5.3 內(nèi)標(biāo)的選擇 ...... 29
3.5.4 色譜條件的選擇 .... 26
3.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 ....... 26
3.7 酒酒球菌培養(yǎng)液中生物胺的測(cè)定 ......... 27
3.8 酒酒球菌安全性評(píng)估 ..... 29
3.9 酒樣中生物胺的檢測(cè)..... 29
第四章 結(jié)論....31
第三章 結(jié)果與分析
3.1 基因組 DNA 的檢測(cè)
按照本試驗(yàn)的方法，將 8 個(gè)酒樣進(jìn)行樣品處理，然后用高效液相色譜檢測(cè)生物胺的含量，結(jié)果見(jiàn)圖 3-15 和表 3-3。
從表 3-3 可以看出，8 個(gè)葡萄酒酒樣中色胺含量從6.54-33.44mg/L 不等，腐胺含量只有酒樣 3 含量較低，為 0.90mg/L。
其余酒樣中腐胺含量均較高，含量從 117.74-290.71mg/L 不等。
3 個(gè)酒樣中沒(méi)檢測(cè)到組胺，其余酒樣中組胺含量從 3.89-8.83mg/L 不等。
酒樣 6 沒(méi)檢測(cè)到酪胺，其余酒樣中酪胺含量從 1.12-7.91mg/L不等。
酒樣中組胺和酪胺含量均低于 9mg/L，低于美國(guó) FDA 規(guī)定的組胺含量低于 50mg/L和酪胺含量低于 100mg/L 的限量標(biāo)準(zhǔn)。
但是澳大利亞、匈牙利和瑞士規(guī)定葡萄酒中組胺含量要低于 10mg/L，法國(guó)規(guī)定葡萄酒中組胺含量要低于 8 mg/L，荷蘭規(guī)定葡萄酒中組胺含量要低于 3.5 mg/L，
比利時(shí)規(guī)定葡萄酒中組胺含量要低于 5-6 mg/L，德國(guó)規(guī)定葡萄酒中組胺含量要低于 2 mg/L(Lehtonen，1996)。
按照澳大利亞、匈牙利和瑞士對(duì)葡萄酒中組胺的限量標(biāo)準(zhǔn)，酒樣均符合標(biāo)準(zhǔn)。
按照法國(guó)和比利時(shí)對(duì)葡萄酒中組胺含量的限量標(biāo)準(zhǔn)，除酒樣 3 外均合格。
按照荷蘭和德國(guó)對(duì)葡萄酒中生物胺的限量標(biāo)準(zhǔn)，只有酒樣 4，5 和 6 符合標(biāo)準(zhǔn)。
結(jié)論
1. 通過(guò)已報(bào)道的文獻(xiàn)，選擇引物對(duì) JV16HC/JV16HC、TD2/TD5 和 AODC1/16 作為特異性引物，以 40 株酒酒球菌基因組 DNA 為模板，
通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，分別對(duì)組氨酸脫羧酶基因、酪氨酸脫羧酶基因和鳥氨酸脫羧酶基因進(jìn)行擴(kuò)增。
擴(kuò)增出 33 株酒酒球菌含有組氨酸脫羧酶基因，21 株酒酒球菌含有酪氨酸脫羧酶基因，16 株酒酒球菌含有鳥氨酸脫羧酶基因。
其中 19 株酒酒球菌含有一種氨基酸脫羧酶基因，11 株酒酒球菌含有二種氨基酸脫羧酶基因，10 株酒酒球菌含有三種氨基酸脫羧酶基因。
40 株酒酒球菌均至少含有一種氨基酸脫羧酶基因。
對(duì) PCR 的退火溫度進(jìn)行了優(yōu)化，得到單重 PCR 以及同時(shí)檢測(cè)組胺和酪胺二重 PCR 的最優(yōu)退火溫度為 50℃，同時(shí)檢測(cè)組胺和腐胺、同時(shí)檢測(cè)酪胺和腐胺的二重 PCR 以及三重 PCR 的最優(yōu)退火溫度為 56℃。
2. 通過(guò)丹磺酰氯柱前衍生反相高效液相色譜的方法檢測(cè) 40 株酒酒球菌是否產(chǎn)生物胺。
色胺的線性方程為：y = 63791x + 24132，在 5-25mg/L 范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為 0.9997，檢測(cè)限為 0.15mg/L;腐胺的線性方程為：y = 70589x + 24148，
在 5-25mg/L 范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為 0.9986，檢測(cè)限為 0.1mg/L;組胺的線性方程為：y = 119166x + 37018，在 5-25mg/L范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為 0.9995，檢測(cè)限為 0.2mg/L;酪胺的線性方程為：y = 134566x + 54018，在 5-25mg/L 范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為 0.9992，檢測(cè)限為 0.2mg/L。
33 個(gè)組氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陽(yáng)性菌株的培養(yǎng)液中均檢測(cè)到了組胺，含量從 12.68-81.64mg/L 不等，7 個(gè)組氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陰性菌株培養(yǎng)液均沒(méi)檢測(cè)到組胺。
21 株酪氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陽(yáng)性菌株培養(yǎng)液均檢測(cè)到了酪胺，含量從 20.42-80.96mg/L 不等，19 株酪氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陰性菌株培養(yǎng)液均沒(méi)檢測(cè)到酪胺。
16 株鳥氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陽(yáng)性菌株培養(yǎng)液均檢測(cè)到了腐胺，含量從 72.54-229mg/L 不等，20 株鳥氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陰性菌株培養(yǎng)液檢測(cè)到微量腐胺，
含量從 2.65-15.47mg/L 不等，4 株鳥氨酸脫羧酶 PCR 檢測(cè)陰性菌株培養(yǎng)液沒(méi)檢測(cè)到腐胺。
參考文獻(xiàn)(略)
生物細(xì)胞論文【3】
生物修復(fù)視野之兩種經(jīng)濟(jì)海藻營(yíng)養(yǎng)鹽吸取及光合作用概述
第一章 緒論
1.1 CO2濃度變化對(duì)大型海藻的影響
自十八世紀(jì)中葉第一次工業(yè)革命以來(lái)，由于人為原因(伐木毀林和礦石燃燒等)導(dǎo)致大氣中 CO2濃度升高了近 40%，而在過(guò)去剛過(guò)去的一個(gè)世紀(jì)內(nèi)大氣 CO2濃度已增加了 110ppm，
達(dá)到 390ppm，且以約 0.55%年增長(zhǎng)率繼續(xù)上升，預(yù)計(jì)到本世紀(jì)下半葉大氣中 CO2濃度將加倍。
關(guān)于陸生植物對(duì)與大氣中 CO2濃度升高生理響應(yīng)已經(jīng)有了豐富的學(xué)術(shù)成果[1-6]，而海洋植物對(duì) CO2濃度升高生理響應(yīng)方面的研究工作則相對(duì)薄弱。
海洋在全球碳循環(huán)中占據(jù)十分重要的地位，Quay[7]等研究表明，海水中碳的總量比大氣中 CO2總量大五十多倍，因此那些過(guò)量排放的 CO2(人為原因產(chǎn)生)很大程度上依靠海洋的吸收，約占 30%-35%左右。
海洋在限制大氣 CO2濃度進(jìn)一步提高和緩和全球變暖的作用越來(lái)越受到國(guó)內(nèi)外有關(guān)學(xué)者的重視。
海洋初級(jí)生產(chǎn)力的 10%左右由大型海藻構(gòu)成，大型海藻對(duì)維持近岸海域 C 循環(huán)穩(wěn)定起著重要的作用，而在光合固 C 能力(CO2的生物削減)和提高海洋初級(jí)生產(chǎn)力也表現(xiàn)出巨大潛力[8, 9]。
因此自上個(gè)世紀(jì)九十年代開(kāi)始，大型藻類對(duì)大氣 CO2濃度的變化的生理響已應(yīng)成為越來(lái)多學(xué)者關(guān)心的問(wèn)題[8, 10, 11]。
天然海水中，無(wú)機(jī)碳 DIC 主要以 CO2、HCO3-和 CO32-的形式存在，三者處在動(dòng)態(tài)平衡之中，并可以相互轉(zhuǎn)換。
其轉(zhuǎn)化關(guān)系如下：CO2(at)<=> CO2(aq)+ H2O <=>H2CO3<=>H++ HCO3-<=> 2H++ CO32-。
這個(gè)動(dòng)態(tài)平衡體系受海水的 pH 值影響，海水 pH的變化，會(huì)影響這三者在海水中含量的百分比。
光合固碳作用是海藻對(duì)海水中無(wú)機(jī)碳利用主要途徑，光合固碳過(guò)程被又稱為卡爾文循環(huán)，即利用光合作用光反應(yīng)產(chǎn)生的 ATP 和 NADPH 將 CO2固定并合成有機(jī)物。
Rubisco是卡爾文循環(huán)關(guān)鍵酶，能催化 RuBP 和 CO2反應(yīng)生成 3-PGA。
每年通過(guò)光合固碳作用被植物固定 CO2達(dá)到近 1014t[10]。
1.2 海水中氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽因子變化對(duì)海藻的生理影響及其引起的富營(yíng)養(yǎng)化現(xiàn)象與海藻對(duì)其的修復(fù)作用
自然海水中，氮營(yíng)養(yǎng)鹽主要由無(wú)機(jī)氮、可溶性有機(jī)氮和顆粒有機(jī)氮組成。
其中無(wú)機(jī)氮的主要以 NH4+、N2、NO3-及 NO2-的形式存在，可被大部分海藻直接吸收利用。
有學(xué)者指出部分海藻也能以一些可溶性有機(jī)氮，如尿素、酰胺和游離氨基酸做氮源。
而相關(guān)研究表明，氨氮濃度過(guò)高對(duì)海藻有毒害作用，高濃度亞硝態(tài)氮會(huì)對(duì)海藻的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用[13]。
自然海水的無(wú)機(jī)磷 Pi 主要包括 PO43-、H2PO4-及 HPO42-，其中 HPO42-約占 95%，為主要成分。
在正常海水 pH 條件下，三者處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡體系中。
無(wú)機(jī)正磷酸鹽為大部分海藻的主要磷源。
有些大型海藻也能以甘油等有機(jī)磷做磷源。
Lundberg 等[37]發(fā)現(xiàn)胞內(nèi)堿性磷酸化酶的活性與細(xì)胞內(nèi)外磷的存在形式有關(guān)，只有當(dāng)細(xì)胞外無(wú)機(jī)磷耗盡，細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的正磷酸鹽和多聚磷酸鹽被利用時(shí)，堿性磷酸化酶才會(huì)在細(xì)胞內(nèi)迅速合成，活性隨之上升。
黃邦欽等[38]研究發(fā)現(xiàn)，一定程度內(nèi)海藻堿性磷酸化酶含量與周圍海水中溶解態(tài) Pi 負(fù)相關(guān)，海水中無(wú)機(jī)磷濃度下降，細(xì)胞內(nèi)藻堿性磷酸化酶含量上升，活性隨之上升。
Weich 等[34]研究了環(huán)境因子對(duì)石莼(Ulva lactuca)體內(nèi)堿性磷酸化酶的活性影響，結(jié)果表明光照和海水中磷濃度降低均能提高該藻堿性磷酸化酶的活性。
第二章 CO2和氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽對(duì)龍須菜的生理影響
2.1 材料與方法
試驗(yàn)用龍須菜采自廣東省汕頭市南澳島。
采集時(shí)海水平均溫度約為 20℃左右。
采集時(shí)選擇色澤紅紫，健康狀態(tài)一致，藻體長(zhǎng)度相近(約 20 公分左右)的藻體。
洗去底泥及附生物，放入帶冰塊的采樣箱中，后迅速帶回實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)。
暫養(yǎng)條件為：溫度 20℃;光照強(qiáng)度 100μmol photons m-2s-1(光照周期 L：D=12h：12h，其中光照時(shí)段為 9：00—21：00);全天 24h 用充氣泵充空氣。
培養(yǎng)介質(zhì)為的自然海水，并添加營(yíng)養(yǎng)鹽 200μmol L-1NaNO3，20μmol L-1NaH2PO4(最終濃度)。
每?jī)商旄鼡Q一次新鮮的培養(yǎng)介質(zhì)，長(zhǎng)期暫養(yǎng)。
試驗(yàn)設(shè)置四種處理?xiàng)l件：正�？諝�、自然海水(用 LCLNP 表示);高濃度 CO2、自然海水(用 HCLNP 表示);正�？諝�、高氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽海水(用 LCHNP 表示);高濃度 CO2、高氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽海水(用 HCHNP 表示)。
將暫養(yǎng)后的實(shí)驗(yàn)材料，按培養(yǎng)密度2.0g FW L-1(鮮重)分裝到盛有 3L 不同培養(yǎng)介質(zhì)的錐形瓶(總計(jì) 12 只)中。
后置于 CO2培養(yǎng)箱(武漢瑞華)中培養(yǎng) 10d。
每種處理設(shè)置三個(gè)重復(fù)，每?jī)商旄鼡Q一次培養(yǎng)介質(zhì)。
其他培養(yǎng)條件均與暫養(yǎng)保持一致。
2.2 結(jié)果
2.2.1 不同濃度 CO2和氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽處理對(duì)龍須菜生長(zhǎng)的影響
從圖 2-1 可以看出，不同 CO2濃度和氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽處理對(duì)龍須菜的 RGR 有明顯的影響。
LCLNP 處理下藻體的 RGR 最低，LCHNP 處理下藻體的 RGR 比 LCLNP 處理提高了近 50%，LCHNP 和 HCHNP 處理?xiàng)l件也能顯著提高龍須菜的的 RGR，比 LCLNP處理分別提高 27.52%和 40.17%。
可見(jiàn)大氣中 CO2濃度升高和海水中營(yíng)養(yǎng)鹽加富對(duì)龍須菜生長(zhǎng)均能起促進(jìn)作用，但是二者濃度在培養(yǎng)介質(zhì)中同時(shí)升高時(shí)，對(duì)龍須菜的生長(zhǎng)的促進(jìn)作用并不是二者單獨(dú)加富的加倍，反而低于 LCHNP 處理下藻體 RGR。
且單獨(dú)加富營(yíng)養(yǎng)鹽處理對(duì)龍須菜的 RGR 提升效果最顯著(P<0.05)。
Fv/Fm 表示藻體光系統(tǒng) II 的最大光合效率，當(dāng)藻體 Fv/Fm 下降時(shí)，代表藻體受到了環(huán)境脅迫。
因此，F(xiàn)v/Fm 是研究光抑制或各種環(huán)境脅迫對(duì)光合作用影響的重要指標(biāo)。
圖2-2 表明，在培養(yǎng)初期，HCLNP 和 HCHNP 處理?xiàng)l件(高濃度 CO2)下，藻體的 Fv/Fm值比其他兩種處理(正�？諝�)要高，但隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加，該值逐漸下降。
而 LCLNP和 LCHNP(正�？諝�)處理?xiàng)l件下，藻體的 Fv/Fm 一直處于比較穩(wěn)定狀態(tài)，沒(méi)有隨培養(yǎng)天數(shù)的增加而變化。
同時(shí)在相同的CO2濃度處理?xiàng)l件下，自然海水處理的藻體的Fv/Fm值始終是略高于高濃度營(yíng)養(yǎng)鹽處理的藻體。
在相同營(yíng)養(yǎng)鹽狀態(tài)生長(zhǎng)的藻體，CO2濃度升高，在培養(yǎng)前期一定程度提高了藻體 Fv/Fm 值，但是隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，CO2濃度對(duì)藻體光合效率的影響不顯著(P>0.05)。
第三章 不同密度、不同溫度及不同營(yíng)養(yǎng)鹽比例....26
3.1 材料與方法.... 26
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)......... 26
3.1.2 測(cè)定指標(biāo)與測(cè)定方法........ 27
3.1.3 統(tǒng)計(jì)分析.... 28
3.2 結(jié)果.... 28
3.2.1 對(duì)生長(zhǎng)的影響........ 28
3.2.2 對(duì)光合效率的影響....... 30
3.2.3 對(duì)磷吸收的影響..... 32
3.4 結(jié)果分析........ 34
3.4.1 對(duì)生長(zhǎng)的影響......... 34
3.4.2 對(duì)光合效率的影響....... 35
3.4.3 對(duì)磷吸收的影響..... 36
3.5 本章小結(jié)......... 38
第四章 氮磷營(yíng)養(yǎng)鹽與培養(yǎng)密度對(duì)壇紫菜生理......39
4.1 材料與方法.... 39
4.2 結(jié)果..... 41
4.3 討論..... 46
4.3.1 對(duì)生長(zhǎng)的影響......... 46
4.3.2 對(duì)光合作用和光合效率及色素含量的影響......... 46
4.3.3 對(duì)營(yíng)養(yǎng)鹽吸收的影響......... 47
4.4 本章總結(jié)......... 48
第四章 氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽與培養(yǎng)密度對(duì)壇紫菜生理特性的影響
由于自然和人為原因(陸源污染的注入和海洋農(nóng)業(yè)等)導(dǎo)致的大量的氮、磷等營(yíng)養(yǎng)鹽在海水中富集，引起的海水富營(yíng)養(yǎng)化現(xiàn)象嚴(yán)重破壞海洋生態(tài)系統(tǒng)，導(dǎo)致海洋環(huán)境惡化。
大規(guī)模養(yǎng)殖海藻能修復(fù)富營(yíng)養(yǎng)化的海水，這一觀點(diǎn)已被國(guó)內(nèi)外學(xué)者普遍認(rèn)可[76]。
自然環(huán)境下的光照、溫度、鹽度、pH 值和潮流是龍須菜生長(zhǎng)的生態(tài)因子。
除此之外，栽培密度等人為因素也是影響龍須菜大規(guī)模養(yǎng)殖的重要生態(tài)條件。
藻類生長(zhǎng)的密度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致養(yǎng)殖區(qū)產(chǎn)量下降，還會(huì)因?yàn)楦街渌宥绊懺宓钠焚|(zhì)，密度過(guò)大則不利于海藻養(yǎng)殖區(qū)域的潮流通暢，藻鉤蝦、團(tuán)水虱及麥稈蟲等敵害生物會(huì)侵食藻類，早成減產(chǎn)、失收[99]。
壇紫菜(Porphyra haitanensis)屬紅藻門(Rhodophyta)、紅毛菜科(Bangiaceae)、紫菜屬(Porphyra)，是一種重要的大型經(jīng)濟(jì)類藻類，
葉狀體呈膜狀，紫色或褐綠色，一般生長(zhǎng)在風(fēng)浪大、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)富足的海灣地區(qū)和淺海區(qū)潮間帶巖石上。
甘紫菜、褐紫菜和壇紫菜是紫菜的幾種主要的物種，條斑紫菜多生長(zhǎng)在北方，浙江和福建沿海地區(qū)則主要養(yǎng)殖壇紫菜。
紫菜具耐寒、有高光飽和點(diǎn)和低光補(bǔ)償點(diǎn)的特點(diǎn)，對(duì)溫度和海水鹽度的適應(yīng)范圍廣，將藻體速干至 20%含水量時(shí)可在-20℃條件下保存一年，重新放回海水中后仍能復(fù)活。
壇紫菜經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，種植主要以經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)為目的，近年來(lái)也開(kāi)始用于生物修復(fù)。
本文初探了氮磷營(yíng)養(yǎng)鹽與培養(yǎng)密度對(duì)壇紫菜生理特性，以期為壇紫菜大規(guī)模養(yǎng)殖和其對(duì)海水富營(yíng)養(yǎng)化的修復(fù)提高理論支持。
結(jié)論
海水富營(yíng)養(yǎng)化和大氣 CO2濃度升高，及其引起的海水酸化一直是困擾海洋生態(tài)系統(tǒng)的兩個(gè)重要生態(tài)環(huán)境問(wèn)題，大型海藻的大規(guī)模養(yǎng)殖能原位修復(fù)近岸海域海洋生態(tài)環(huán)境，
一定程度上緩解大氣 CO2濃度進(jìn)一步升高和修復(fù)富營(yíng)養(yǎng)化的海水。
這一個(gè)觀點(diǎn)，已經(jīng)被國(guó)內(nèi)外相關(guān)學(xué)者普遍認(rèn)同。
本研究在此背景下進(jìn)行，本研究以中國(guó)南方海域大型經(jīng)濟(jì)龍須菜和壇紫菜為研究材料，通過(guò)不同條件的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，
初步研究了 CO2、氮、磷營(yíng)養(yǎng)鹽及培養(yǎng)密度等環(huán)境因子對(duì)這兩種大型海藻的營(yíng)養(yǎng)鹽吸收及光合作用等方面的影響。
結(jié)果如下：大氣中 CO2濃度升高和海水中營(yíng)養(yǎng)鹽加富對(duì)龍須菜生長(zhǎng)均能起促進(jìn)作用。
高濃度的營(yíng)養(yǎng)鹽培養(yǎng)會(huì)降低龍須菜的光合效率下降，是其生長(zhǎng)環(huán)境的一種脅迫。
高 CO2濃度、高濃度營(yíng)養(yǎng)鹽處理?xiàng)l件下，培養(yǎng)介質(zhì)中高濃度 NO3-能促進(jìn)龍須菜對(duì) Pi 的吸收，高濃度Pi 卻一定程度抑制了龍須菜對(duì) NO3-的吸收。
壇紫菜在高溫和高密度條件下生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，高溫和高密度處理也會(huì)降低壇紫菜的光化學(xué)效率，壇紫菜對(duì)培養(yǎng)介質(zhì)中的 Pi 吸收特性受到培養(yǎng)密度、溫度及培養(yǎng)海水營(yíng)養(yǎng)鹽比例(C/P)的影響。
吸收能力與培養(yǎng)密度正相關(guān)，在一定溫度范圍內(nèi)，吸收能力隨溫度的升高而上升，但高溫條件下，會(huì)抑制其 Pi 的吸收。
而低溫條件下，其對(duì)Pi 的吸收效率最高，親和力最強(qiáng)。
在海水營(yíng)養(yǎng)鹽濃度充足的條件下，壇紫菜對(duì) Pi 的吸收能力，與培養(yǎng)介質(zhì)中營(yíng)養(yǎng)鹽比例(C/P)正相關(guān)。
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