小議應(yīng)用微柱凝膠法鑒定新生兒血型

【摘要】  目的探討卡式微柱凝膠血型鑒定法在鑒定新生兒血型中的應(yīng)用。方法選取100份新生兒外周血標(biāo)本，采用鹽水試管法和卡式微柱凝膠法同時(shí)進(jìn)行ABO和Rh(D)血型鑒定。結(jié)果試管法正定型符合率98%，微柱凝膠法正定型符合率100%。結(jié)論微柱凝膠法檢測新生兒的ABO和Rh(D)血型時(shí)優(yōu)于傳統(tǒng)試管法。

【關(guān)鍵詞】  微柱凝膠法;新生兒;血型

　　由于新生兒的ABO血型抗原較成年人弱，約只有成人的1/4，且含有來自母體的抗體，免疫反應(yīng)相對(duì)較弱[1]，故血型血清學(xué)的檢測難度較大，所以新生兒血型只能由檢測紅細(xì)胞抗原正定型來鑒定其ABO血型。長期以來人們一直沿用的手工法操作不易標(biāo)準(zhǔn)化，且干擾因素較多，血型錯(cuò)檢時(shí)有發(fā)生，1986年Lapierre發(fā)明了微柱凝膠技術(shù)并用于鑒定血型，該方法具有易于自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化、反應(yīng)結(jié)果可靠和特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，在許多醫(yī)院和血站被應(yīng)用[2] 。該系統(tǒng)的基本原理是通過微小的凝膠顆粒構(gòu)成的濾網(wǎng)在系統(tǒng)內(nèi)控制離心的條件下，將凝集的紅細(xì)胞和游離的紅細(xì)胞分離開來，從而形成不同的反應(yīng)圖譜，再通過系統(tǒng)的自動(dòng)判讀裝置判斷血型[3]。自2010年開始本院檢驗(yàn)科采用該技術(shù)鑒定新生兒血型，在結(jié)果的準(zhǔn)確性和操作的方便性上都有了很大程度的提高。

　　1材料與方法

　　1.1標(biāo)本來源

　　100例標(biāo)本來自2010年1月—2011年8月本院新生兒病房，每名新生兒抽EDTA抗凝血2ml。

　　1.2試劑與儀器

　　微柱凝膠血型卡(DianaGel Confirm)、離心機(jī)由北京斑珀斯技術(shù)技貿(mào)有限公司提供�？笰、抗B血型定型試劑由長春生物制品研究所提供，Rh抗D血型定型試劑由上海血液生物制品研究所提供。

　　1.3檢測方法

　　鹽水試管法參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]，取受檢者5%紅細(xì)胞懸液20μl，抗-A、抗-B、抗-D血清各100μl，混勻，3200r/min離心15s，顯微鏡觀察結(jié)果，鏡下凝集者應(yīng)判為陽性。

　　1.4微柱凝膠法

　　將病人EDTA抗凝血充分離心3000轉(zhuǎn)/5min，取紅細(xì)胞50μl加生理鹽水1ml制成5%的紅細(xì)胞懸液。撕開卡上的錫紙膜，在A-B-D-ctl四個(gè)孔內(nèi)分別懸空加入病人5%紅細(xì)胞懸液10μl，將卡放在專用離心機(jī)中離心9min，離心結(jié)束后在白色背景下觀察結(jié)果。

　　2結(jié)果

　　微柱凝膠法正定型結(jié)果凝集強(qiáng)度全部達(dá)到3+以上，錯(cuò)檢率為0;鹽水試管法凝集強(qiáng)度達(dá)到3+以上為95%，結(jié)果為散在凝集需借助顯微鏡確定為3%，有2例錯(cuò)檢，后經(jīng)證實(shí)與微柱凝膠法結(jié)果一致。

　　3討論

　　卡式微柱凝膠法是1986年Lapierre發(fā)明的一項(xiàng)免疫學(xué)檢測新技術(shù)，是微柱凝膠技術(shù)與以往血型鑒定技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物，其敏感度高，可用于臨床困難血型的鑒定，經(jīng)過不斷的改進(jìn)和大量的臨床應(yīng)用，在許多發(fā)達(dá)國家此技術(shù)已作為常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)應(yīng)用于臨床。新生兒的ABO血型抗原較成人弱，約只有成人的1/4 ，其ABO抗原弱的原因并非缺少糖苷轉(zhuǎn)移酶，而是由于紅細(xì)胞上酶的底物少。新生兒可以從母親獲得IgG ABO抗體，但I(xiàn)gM ABO抗體卻在出生3～6個(gè)月后才合成[5]。微柱凝膠正定型具有檢測敏感性高、特異性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確、易于觀察、影響因素少的特點(diǎn)，特別是對(duì)抗原較弱的新生兒紅細(xì)胞抗原檢測更表現(xiàn)出其優(yōu)越性。試驗(yàn)中出現(xiàn)的3例抗原性弱的、需借助顯微鏡確定的標(biāo)本，就都是由于A或B抗原極弱，用傳統(tǒng)的試管法鑒定血型時(shí)，傳統(tǒng)試管法的鏡下凝集需借助顯微鏡觀察，操作繁雜且有一定的困難。微柱凝膠法能用肉眼直接觀察到極弱的陽性反應(yīng)(±)，能使肉眼不易察覺的凝集(鏡下1～3個(gè)紅細(xì)胞的凝集)明顯化。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)于血型抗原減弱的新生兒，應(yīng)用微柱凝膠法能夠成功準(zhǔn)確地檢測出其ABO血型，較之傳統(tǒng)的試管法準(zhǔn)確、簡便、快捷、安全，也減少了實(shí)驗(yàn)人員接觸血液的機(jī)會(huì)，易于批量使用，尤其適合兒科和新生兒科標(biāo)本的檢測。

【參考文獻(xiàn)】
  　　1羅春麗，劉體全. 臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)，第2版. 北京:人民衛(wèi)生出版社，1997：97.

　　2Lapierre Y，Rigal D，Adam J，et al.The gel test:a newway to detect red cell antigen antibody reactions.Transfusion，1990，30:109-113.

　　3Tills D，Bushrod J，Ward DJ，et al.Typing of normal and variant red cells with ABO，RH，and Kell typing reagents using a gel typing system.Immunohematology，1991，7:94.

　　4葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程，第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：246.

　　5Mollison PL.Blood transfusion in clinical medicone.London:Blackwell Scientific Publication，1979：243.

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